QIEP

Translocasa SecA

Oriol Monte & Ainhoa González

Grup G · Química i Enginyeria de Proteïnes 2024-2025

Seqüència problema

Aquesta és la cadena aminoacídica analitzada. La identificació de la proteïna o del constructe es fa a partir d’aquesta seqüència, i totes les correspondències amb UniProt, PDB, CATH/ECOD o AlphaFold s’han d’interpretar en relació amb aquesta numeració.

>sp|P10408|SECA_ECOLI Protein translocase subunit SecA OS=Escherichia coli (strain K12) OX=83333 GN=secA PE=1 SV=2 | 2024-2025 | seqüència problema
MLIKLLTKVFGSRNDRTLRRMRKVVNIINAMEPEMEKLSDEELKGKTAEFRARLEKGEVLENLIPEAFAVVREASKRVFG
MRHFDVQLLGGMVLNERCIAEMRTGEGKTLTATLPAYLNALTGKGVHVVTVNDYLAQRDAENNRPLFEFLGLTVGINLPG
MPAPAKREAYAADITYGTNNEYGFDYLRDNMAFSPEERVQRKLHYALVDEVDSILIDEARTPLIISGPAEDSSEMYKRVN
KIIPHLIRQEKEDSETFQGEGHFSVDEKSRQVNLTERGLVLIEELLVKEGIMDEGESLYSPANIMLMHHVTAALRAHALF
TRDVDYIVKDGEVIIVDEHTGRTMQGRRWSDGLHQAVEAKEGVQIQNENQTLASITFQNYFRLYEKLAGMTGTADTEAFE
FSSIYKLDTVVVPTNRPMIRKDLPDLVYMTEAEKIQAIIEDIKERTAKGQPVLVGTISIEKSELVSNELTKAGIKHNVLN
AKFHANEAAIVAQAGYPAAVTIATNMAGRGTDIVLGGSWQAEVAALENPTAEQIEKIKADWQVRHDAVLEAGGLHIIGTE
RHESRRIDNQLRGRSGRQGDAGSSRFYLSMEDALMRIFASDRVSGMMRKLGMKPGEAIEHPWVTKAIANAQRKVESRNFD
IRKQLLEYDDVANDQRRAIYSQRNELLDVSDVSETINSIREDVFKATIDAYIPPQSLEEMWDIPGLQERLKNDFDLDLPI
AEWLDKEPELHEETLRERILAQSIEVYQRKEEVVGAEMMRHFEKGVMLQTLDSLWKEHLAAMDYLRQGIHLRGYAQKDPK
QEYKRESFSMFAAMLESLKYEVISTLSKVQVRMPEEVEELEQQRRMEAERLAQMQQLSHQDDDSAAAAALAAQTGERKVG
RNDPCPCGSGKKYKQCHGRLQ

Seqüència recuperada de UniProt P10408. Longitud: 901 aminoàcids. Cisteïnes: 98, 885, 887, 896.

Identificació i estructura de referència

A partir de la seqüència anterior i de les bases de dades principals de seqüència i estructura, la proteïna s’identifica com a traslocasa SecA. L’estructura de treball s’ha d’interpretar sempre comprovant que el PDB triat cobreix prou bé la seqüència analitzada; si hi ha diversos PDB possibles, la resolució només és decisiva després de comprovar cobertura, identitat, estat del lligand i rellevància biològica.

Camp Valor
UniProt / gen P10408; gen: secA
EC / BRENDA 7.4.2.8
Estructura principal 2FSF
Plegament o família ATPasa motora amb dominis NBD/HSD/HWD/PPXD que canvien de disposició durant el cicle de translocació
Estructura secundària i lectura ChimeraX motor SecA amb dominis NBD i dominis de moviment; cal relacionar estat nucleotídic, solc de preproteïna i canvis conformacionals
Lligands, cofactors o lloc funcional ATP/ADP i interacció amb preproteïna/SecYEG; no és un lloc catalític d’un enzim soluble convencional sinó un motor ATP-dependent

La transferència de residus funcionals requereix conservar la correspondència entre la numeració de la seqüència i la del model estructural, especialment quan l’estructura prové d’un homòleg, d’un domini aïllat o d’un model predictiu. SecA és una ATPasa de translocació que acobla hidròlisi d’ATP i transport de proteïnes a través del sistema Sec.

Arquitectura molecular

SecA combina dominis d’unió a ATP amb superfícies que contacten el translocó SecYEG i la proteïna client. L’estructura s’entén com una ATPasa motora modular.

Figura 1 del grup G 2024-2025
Figura 1. Translocasa SecA: vista global del plegament.
Figura 2 del grup G 2024-2025
Figura 2. Translocasa SecA: elements d’estructura secundària.

Lloc funcional i mecanisme

La hidròlisi d’ATP impulsa canvis conformacionals que afavoreixen el pas de segments polipeptídics pel canal de translocació.

Estructura de SecA com a ATPasa modular de translocació proteica.
Figura. Estructura de SecA com a ATPasa modular de translocació proteica. Font: RCSB PDB 2FSF.

La interpretació estructural i funcional d’aquest sistema es pot situar en el context de la literatura experimental corresponent (Hunt et al., 2002).

Figura 3 del grup G 2024-2025
Figura 3. Translocasa SecA: regió funcional o cavitat principal.
Figura 4 del grup G 2024-2025
Figura 4. Translocasa SecA: superfície molecular.

Modificacions i variants

La lectura funcional se centra en variants de dominis i estat nucleotídic; les modificacions posttraduccionals no són el component principal de SecA bacteriana. Les modificacions, mutacions o variants només tenen valor estructural si s’indiquen amb residu, numeració i equivalència amb el PDB o model usat a les figures.

Relació seqüència-estructura-funció

La relació seqüència-estructura-funció s’ha d’interpretar situant sobre el model els residus que estabilitzen el plegament i els que defineixen el lloc funcional. Les variants, els lligands o els cofactors només són informatius si es manté la correspondència entre la numeració de la seqüència i la del PDB o model utilitzat.

Figura 5 del grup G 2024-2025
Figura 5. Translocasa SecA: contactes amb lligands o cofactors.
Figura 6 del grup G 2024-2025
Figura 6. Translocasa SecA: interfície o estat oligomèric.
Figura 7 del grup G 2024-2025
Figura 7. Translocasa SecA: detall de residus rellevants.
Figura 8 del grup G 2024-2025
Figura 8. Translocasa SecA: representació complementària del model.
Figura 9 del grup G 2024-2025
Figura 9. Translocasa SecA: vista global del plegament.
Figura 10 del grup G 2024-2025
Figura 10. Translocasa SecA: elements d’estructura secundària.

Referències